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ELISA检测酶联免疫吸附测定(ELISA) 酶联免疫吸附测定,是指利用抗体分子能与抗原分子特异性结合的特点,将游离的杂蛋白和结合于固相载体的目的蛋白分离,并利用特殊的标记物对其定性或定量分析的一种检测方法。
实验意义 ELISA是免疫学中的经典实验,是将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。包括直接ELISA、夹心ELISA、竞争ELISA,最常用的是夹心ELISA。 实验步骤 1. 将具有专一性的抗体包被(coating)于塑胶孔盘上,完成后洗去多余抗体 2. 加入待测样本,待测样本中若含有待测的抗原,则其会与塑胶孔盘上的抗体进行专一性结合 3. 洗去多余待测样本,加入另一种抗待测抗原的抗体(检测抗体),与待测抗原进行结合 4. 洗去多余未结合的检测抗体,加入酶标记二抗,与检测抗体结合 5. 洗去多余未结合二抗,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或仪器读取呈色结果 结果展示 提供结果 实验报告,包括试剂名称、仪器型号、操作步骤和结果分析等; 实验原始数据。 |