杰凯生物 科 研 服 务
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基因编辑动物模型ES细胞打靶 在小鼠胚胎干细胞（ES 细胞）中进行 DNA 同源重组，将 ES 细胞重新注射到囊胚腔中，可以形成嵌合胚胎，并能在假孕小鼠体内发育，最终发育为嵌合体小鼠。这种嵌合小鼠的组织细胞（包括生殖细胞）可以分别来自囊胚的细胞和被注射的ES细胞。因此，通过嵌合小鼠和野生型小鼠的交配，ES 细胞中的遗传信息就能够传递到后代的小鼠个体中。 利用ES细胞打靶技术建立基因修饰小鼠模型的主要技术路线： （1）构建重组基因载体（正负双向选择系统） （2）用电穿孔等方法把重组DNA转入受体ES细胞内 （3）用选择培养基筛选抗药ES细胞，并利用PCR或或 Southern blot 等方法鉴定发生正确同源重组的ES细胞 （4）将中靶ES细胞注射到受体囊胚中，将注射后存活的胚胎移植到假孕小鼠子宫中，让其受孕，待小鼠出生后， 通过观察毛色的嵌合与否和嵌合程度判断是否获得嵌合体小鼠。 |
